Skip to content

Immunologiczne oczyszczanie szpiku za pomocą PCR przed autologicznym przeszczepem szpiku kostnego w przypadku chłoniaka z komórek B czesc 4

4 miesiące ago

487 words

Regresję proporcjonalnych hazardów Coxa45 zastosowano w próbie oszacowania wpływu współzmiennych na ryzyko nawrotu. Krzywe przeżycia wolnego od choroby oszacowano zgodnie z metodą Kaplan i Meier46 i porównano testem log-rank. Wyniki
Wynik oczyszczenia
Komórki limfatyczne wykrywające klonowanie i PCR
Rysunek 1. Rycina 1. Wyniki oczyszczania immunologicznego według oceny klonogennego wzrostu komórek w modelu linii komórkowej guza. Komórki Raji rozcieńczono w stosunku 1:20 w napromieniowanych prawidłowych komórkach jednojądrzastych szpiku, a wzrost komórek badano jak opisano w sekcji Metody przed i po traktowaniu przeciwciałami monoklonalnymi anty-B1, anty-B5 i anty-J5. i z dopełnieniem (C). Wartości to średnie + SE.
Zdolność do oczyszczania komórek nowotworowych z prawidłowego szpiku kostnego za pomocą przeciwciał monoklonalnych i dopełniacza badano za pomocą modelu komórek nowotworowych in vitro. Linię komórkową chłoniaka Raji dodano do komórek jednojądrzastych szpiku kostnego od zdrowych dawców w stosunku 1:20. Zawiesinę traktowano każdym monoklonalnym przeciwciałem samym, z przeciwciałami w połączeniu, i w obecności dopełniacza przez łącznie trzy cykle leczenia, w celu zubożenia szpiku klonogennych komórek Raji. Jak pokazano na Fig. 1, wzrost klonogennej linii komórek nowotworowych był zmniejszony po immunologicznym oczyszczeniu in vitro z przeciwciałem monoklonalnym przeciwko komórkom B i anty-B1, anty-B5 lub anty-J5 i dopełniaczem, w porównaniu z oczyszczaniem za pomocą sam przeciwciało lub dopełniacz (P = 0,014). W tym teście, liza przeciwciała i dopełniacza była zdolna do około 3-logowego zabijania linii komórek nowotworowych. Dwa lub trzy przeciwciała w połączeniu zmniejszały wzrost klonogennych komórek nowotworowych bardziej niż samo pojedyncze przeciwciało (P = 0,0066).
Figura 2. Figura 2. Wykrywanie metodą Southern Blot sekwencji specyficznych dla translokacji bcl-2 amplifikowanych przez PCR. Panel A pokazuje wyniki analizy PCR .g DNA z próbek szpiku uzyskanych od trzech reprezentatywnych pacjentów przed leczeniem (ścieżka A) i po każdym z trzech terapii (ścieżki B, C i D) z przeciwciałami monoklonalnymi i dopełniaczem; bp oznacza pary zasad. Pacjenci i 2 nie mieli wykrywalnych komórek chłoniaka po trzecim cyklu leczenia. Pacjent 3 wykazywał objawy choroby resztkowej po trzech terapiach.
Panel B pokazuje wyniki przed (ścieżka A) i po (linia B) trzecim cyklu oczyszczania przeciwciałami monoklonalnymi i dopełniaczem u dziewięciu reprezentatywnych pacjentów (innych niż pacjenci reprezentowani w panelu A); .g DNA z każdej próbki analizowano przez amplifikację PCR. Pacjenci 1, 2, 3 i 4 nie mieli szczątkowego chłoniaka, a Pacjenci 5, 6, 7, 8 i 9 mieli resztkową chorobę.
Aby określić, czy płukanie immunologiczne może wytępić komórki chłoniaka ze szpiku kostnego pacjentów, zmniejszając ich liczbę do poziomu poniżej granicy wykrywalności za pomocą PCR, przeanalizowaliśmy próbki od 10 pacjentów, których szpik zawierał komórki z translokacją bcl-2. Każdą próbkę traktowano przeciwciałami monoklonalnymi anty-B1, anty-B5 i anty-J5 i dopełniano i przemywano w pożywce zawierającej dezoksyrybonukleazę, aby zapewnić, że oczyszczone DNA komórki nowotworowej nie było oczyszczone podczas procesu ekstrakcji
[hasła pokrewne: wamed zgierz, skała osadowa krzyżówka, mastermedia lublin ]

0 thoughts on “Immunologiczne oczyszczanie szpiku za pomocą PCR przed autologicznym przeszczepem szpiku kostnego w przypadku chłoniaka z komórek B czesc 4”