Skip to content

Immunologiczne oczyszczanie szpiku za pomocą PCR przed autologicznym przeszczepem szpiku kostnego w przypadku chłoniaka z komórek B ad 5

3 miesiące ago

532 words

DNA ekstrahowano z próbek uzyskanych przed i po każdym z trzech cykli przedmuchiwania, a .g DNA z każdej próbki analizowano przez amplifikację PCR. Po trzecim cyklu leczenia nie można było wykryć żadnych komórek chłoniaka metodą PCR w sześciu próbkach szpiku kostnego. W każdym przypadku wymagane były trzy cykle leczenia w celu eliminacji wszystkich komórek wykrywalnych przez PCR. Wyniki uzyskane przez amplifikację PCR próbek uzyskanych przed i po każdym z trzech cykli leczenia od trzech reprezentatywnych pacjentów pokazano na Figurze 2A. Po trzecim leczeniu nie wykryto komórek chłoniaka w próbkach od pacjentów i 2, ale szczątkowe DNA swoiste dla chłoniaka znaleziono w próbce od Pacjenta 3. Wyniki tych badań u naszych pacjentów potwierdziły wyniki innych badań dotyczących komórek chłoniaka lines.47 Resztkowe komórki chłoniaka
Na dzień 28 grudnia 1990 r. 205 pacjentów z chłoniakiem nieziarniczym z limfocytów B było leczonych w naszym ośrodku identycznym protokołem, który obejmował chemioterapię w dużych dawkach, napromienianie całego ciała i oczyszczanie autologicznego szpiku przed przeszczepem. Pacjenci zostali włączeni do niniejszego badania, jeśli mieli udokumentowany punkt przerwania translokacji bcl-2, który można było zamplifikować za pomocą PCR, i czy próbki szpiku były dostępne do analizy przed i po lizie. Translokację bcl-2 zidentyfikowano metodą PCR w tkance diagnostycznej 125 pacjentów, a próbki szpiku uzyskane przed i po oczyszczeniu były dostępne dla 114 pacjentów. Ponadto próbki były dostępne przed i po oczyszczeniu u 47 pacjentów, u których występował chłoniak nieziarniczy z limfocytów B, bez translokacji z udziałem bcl-2, którą można amplifikować za pomocą PCR. Te próbki analizowano jako kontrole.
DNA zostało wyekstrahowane z próbek przed i po oczyszczeniu, a PCR przeprowadzono w głównych i mniejszych regionach przerwania translokacji bcl-2, aby ocenić, czy obecne są komórki chłoniaka. Każdą z próbek uzyskanych przed i po oczyszczeniu analizowano cztery razy, a badacze byli zaślepieni pod względem wyniku klinicznego u pacjenta i czy wcześniej zidentyfikowano translokację bcl-2 u tego pacjenta. W szpiku kostnym uzyskanym przed płukaniem wykryto naciek limfatyczny przez PCR u wszystkich 114 pacjentów, u których wykryto translokację bcl-2 w tkance diagnostycznej. Immunologiczne płukanie spowodowało zmniejszenie liczby komórek chłoniaka wykrywalnych przez PCR w oczyszczonych próbkach od 57 pacjentów; szczątkowe komórki chłoniaka wykryto metodą PCR w próbkach od pozostałych 57 pacjentów. Odkrycia w reprezentatywnych próbkach od dziewięciu pacjentów przed i po oczyszczeniu przedstawiono na rysunku 2B. Ścieżki dla pacjentów 1, 2, 3 i 4 reprezentują próbki, w których nie można wykryć żadnych komórek chłoniaka z translokacją bcl-2 w oczyszczonej próbce za pomocą PCR, a ścieżki dla pacjentów 5, 6, 7, 8 i 9 reprezentują próbki, w których komórki chłoniaka pozostawały wykrywalne przez PCR po przeczyszczeniu. Chociaż w każdej reakcji PCR analizowano równe ilości DNA, nie wykazano żadnej korelacji między intensywnością sygnału PCR w próbce przed oczyszczaniem a wykrywaniem resztkowych komórek chłoniaka po tym. Przeprowadzono PCR z seryjnymi rozcieńczeniami próbek prelysis i postlysis w celu określenia miana, przy którym nie można było już wykryć produktu PCR, w celu uzyskania półilościowej oceny DNA z translokacją w każdej próbce.
[podobne: medycyna kliniczna definicja, cordis poznan, półpasiec objawy u dorosłych ]

0 thoughts on “Immunologiczne oczyszczanie szpiku za pomocą PCR przed autologicznym przeszczepem szpiku kostnego w przypadku chłoniaka z komórek B ad 5”